革蘭氏染色實驗流程
日期:2016-10-04 10:21:04 訪問次數:890
1、 取載玻片用紗布擦干,載玻片的一面用marker筆畫一個小圈(用來大致確定菌液滴的位置)。涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂。
2、 涂片:
液體培養基:左手持菌液試管,在酒精燈火焰附近5cm左右打開管蓋;右手持接種環在火焰中燒灼滅菌,等冷卻后從試管中沾取菌液一環,在潔凈無脂的載玻片上涂直徑2mm左右的涂膜,最后將接種環在火焰上燒灼滅菌。
固體培養基:先在載玻片上滴一滴無菌水,再用接種環取少量菌體,涂在載玻片上,使其薄而均勻。
3、 晾干:讓涂片在空氣中自然干燥。
4、 固定:讓菌膜朝上,通過火焰2-3次固定(以不燙手為宜)。
5、 染色:將固定過的涂片放報紙上,滴加草酸銨結晶紫液,染1min。
6、 水洗:用水緩慢沖洗涂片上的染色液,用吸水紙吸干。簡單染色結束可觀察細胞形態。
7、 媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗。
8、 脫色:吸去殘留水,連續滴加95%乙醇脫色20-30s至流出液無紫色,立即水洗。
9、 復染:滴加蕃紅復染1min,水洗。至此,革蘭氏染色結束。